Руководство по методам микробиологической диагностики

Общие замечания

T По возможности, материал для микробиологической диагностики следует брать до начала лечения.

T Материал, подлежащий анализу, следует доставлять в микробиологическую лабораторию как можно быстрее. В случаях длительной транспортировки необходимо использовать подходящую среду.

T Доказательство бактериальной природы заболевания не всегда эквивалентно идентификации этиологического агента. Для интерпретации результатов микробиологического анализа часто требуется информация о нормальной бактериальной флоре.

T Тесное сотрудничество с клиническими микробиологами обычно помогает прояснить неясные результаты

T В определенных случаях (например, при менингите) может быть необходимо немедленное приготовление препаратов на предметных стеклах.

Общие замечания

Окрашивание по Граму

T Препарат на предметном стекле высушивают на воздухе и фиксируют нагреванием.

T Препарат окрашивают генцианом фиолетовым или кристаллическим фиолетовым в течение примерно 2 минут. Затем краситель сливают.

T Производят окраску в растворе Люголя в течение примерно 2 минут. Затем краситель сливают.

T Промывают препарат спиртом до видимого обесцвечивания. Затем промывают водой.

T Производят контрастирующее окрашивание фуксином в течение примерно 1 минуты. Промывают препарат водой.

Грамположительные бактерии окрашиваются в синий цвет.

Грамотрицательные бактерии окрашиваются в красный цвет.



Окрашивание по Цилю-Нильсену

(для идентификации кислотоустойчивых бацилл)

T Препарат на предметном стекле высушивают на воздухе и фиксируют нагреванием.

T На препарат наносят карболфуксин, после чего нагревают стекло три раза до температуры кипения.

T Проводят дифференцирование с помощью спирта + HCl в течение примерно 1-2 минут.

T Затем производят контрастирующее окрашивание щелочным метиленовым синим в течение примерно 3 минут.

Кислотоустойчивые бациллы окрашиваются в красный цвет.

Другие бациллы окрашиваются в синий цвет.



Окрашивание метиленовым синим Лефлера

T Препарат на предметном стекле высушивают на воздухе и фиксируют нагреванием.

T Наносят на препарат несколько капель метиленового синего Лефлера и оставляют примерно на 2 минуты. Затем сливают краситель и промывают препарат водой.

Бактерии окрашиваются в ярко-синий цвет.

Человеческие клетки окрашиваются в бледно-синий цвет.